问题:
1958年Meselson和Stahl设计了一个实验证明了DNA的复制为半保留复制。他们把大肠杆菌在含有15N的单一氮源(NH4C1)中培养很多代后转移到仅含14N的培养介质中,使所有细胞增殖一代,从这些第一代细胞制备的DNA仍然在CsCl密度梯度中形成单一的带,但它的密度表明,这些DNA分子是含有一条15N链和一条14N链的杂合双链。如果让细胞在“轻”介质中增殖两代,所提取的DNA可被CsCl密度梯度平衡超离心分离成两条带,其中一条带是“重”“轻”杂合双链DNA,另一区带DNA则完全是由“轻”链(14N)组成。这个实验结果证实了DNA复制是半保留的。
所有的DNA聚合酶都是以5’—三磷酸脱氧核苷为底物,以单链DNA为模板按5’→3’方向合成,这是DNA聚合酶的催化特性所决定的。DNA复制时亲本DNA双链是逐步被解开的,两条DNA模板链是反平行的,即一条链的走向是5’→3’,另一条链的走向是3’→5’。以3’→5’链为模板链的DNA,其合成与复制叉移动方向一致,所以可以连续地合成;而在以5’→3’链为模板链的DNA的合成与复制叉移动方向相反,所以只能是模板链解开一段,DNA复制一段,因此是半不连续的。
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